2008/12/19
[3510]
中華人民共和國進出口商品檢驗行業(yè)標準 中華人民共和國進出口商品檢驗行業(yè)標準
出口禽肉中莫能菌素殘留量檢驗方法
生物自顯影法 SN 0296一93
Method for the determination of monensin
residues in poultry meat for export
?Bioautography method
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1 主題內(nèi)容與適用范圍
本標準規(guī)定了出口禽肉中莫能菌素殘留量的抽樣、制樣和生物自顯影測定法。
本標準適用于出口凍雞中莫能菌素殘留量的檢驗。
2 抽樣和制樣
2.1 檢驗批
以不超過2500件商品為一檢驗批。
同一檢驗批的商品應具有相同特征,如包裝、標記、產(chǎn)地、規(guī)格和等級等。
2.2 抽樣數(shù)量
批量,件 zui低抽樣數(shù),件
1～25 1
26～100 5
101～250 10
251～500 15
501～1000 17
1001～2500 20
2.3 抽樣方法
按2.2規(guī)定的抽樣件數(shù)隨機抽取,逐件開啟。每件至少取一袋作為原始樣品,原始樣
品總量不少于2kg,放入清潔容器內(nèi),加封后標明標記,及時送交實驗室。
2.4 樣品制備
從每袋原始樣品中取出部分有代表性樣品,將可食部分放入高速組織搗碎機中搗碎均
勻,充分混勻,用四分法縮分出不少于1kg試樣。裝入清潔容器內(nèi),加封后標明標記。
2.5 樣品保存
將試樣于?18℃冷凍保存。
注：在抽樣及制樣過程中,必須防止樣品受到污染或發(fā)生殘留物含量的變化。
3 測定方法
3.1 方法提要
用甲醇提取肉樣中莫能菌素,經(jīng)四氯化碳萃取后濃縮至干,以甲醇溶解殘留物,用薄
層分離,再用生物自顯影法測定。
3.2 設(shè)備和材料
3.2.1 微量注射器：50 μL。
3.2.2 薄層板：硅膠,Q/YT 257?85SG,5cm×20cm,使用前110℃活化2h。
3.2.3 展開缸：240mm×57mm×32mm。
3.2.4 游標卡尺：測量范圍0～200mm,精度0.02mm或使用抑菌圈測量儀測量。
3.2.5 離心機：轉(zhuǎn)速3000 r/min。
3.2.6 旋轉(zhuǎn)濃縮器。
3.2.7 恒溫培養(yǎng)箱：37±1℃。
3.2.8 高壓滅菌器。
3.2.9 長方形培養(yǎng)皿：20cm×10cm×5cm。
3.2.10 均質(zhì)器：帶均質(zhì)杯250mL。
3.3 試劑和培養(yǎng)基
3.3.1 試劑
3.3.1.1 甲醇：分析純。
3.3.1.2 四氯化碳：分析純。
3.3.1.3 乙酸乙酯: 分析純。
3.3.1.4 莫能菌素標準品: 960μg（效價）/mg（中國獸藥監(jiān)察所提供）。
3.3.1.5 試驗菌種：枯草桿菌（Bacillus subtilis）, 菌種號ATCC 6633（衛(wèi)生部藥品生物
制品檢定所提供）。
3.3.2 培養(yǎng)基
3.3.2.1 菌種用培養(yǎng)基（見附錄A 第A1章）。
3.3.2.2 生物自顯影用培養(yǎng)基（見附錄A第A2章）。
3.3.2.3 肉湯培養(yǎng)基（見附錄A第A3章）。
3.4 測定步驟
3.4.1 工作液制備
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